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实验二 植物染色体核型分析

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实验二 植物染色体核型分析
一、实验目的:
1.掌握染色体组型分析方法。 1.掌握染色体组型分析方法。 2.分析染色体组型计算有关数据。 2.分析染色体组型计算有关数据。

二、实验原理: 一个二倍体植物的配子的全套染色体, 称为一个染色体组。各种动植物的体细胞, 都有其特定的染色体组型。染色体组型或 称为核型是指染色体组在有丝分裂中期的 表型,包括这一组染色体的数目、大小、 形态、着丝点位置以及付溢痕、随体的有 无等。染色体组型分析就是对染色体组中 的染色体作上述各种形态特征的描述。

二、实验原理 一般有四种方法。 (1)常规的形态分析。选用分裂旺盛 细胞的有丝分裂中期的染色体制成染色体组 型图,以测定各染色体的长度(微米)或相 对长度(%),着丝粒位置及染色体两臂长 的比例(臂比),鉴别随体及副缢痕的有无 作为分析的依据。

(2)带型分析。显带技术是通过特殊的染色方法使染色 体的不同区域着色,使染色体在光镜下呈现出明暗相间的 带纹。每个染色体都有特定的带纹,甚至每个染色体的长 臂和短臂都有特异性。根据染色体的不同带型,可以更细 致而可靠地识别染色体的个性。 (3)着色区段分析。染色体经低温、KCl和酶解, )着色区段分析。染色体经低温、KCl和酶解, HCl或HCl与醋酸混合液体等处理后制片,能使染色体出 HCl或HCl与醋酸混合液体等处理后制片,能使染色体出 现异固缩反应,使异染色质区段着色可见。在同源染色体 之间着色区段基本相同,而在非同源染色体之间则有差别。 因此用着色区段可以帮助识别染色体,作为分析染色体组 型的一种方法。 (4)定量细胞化学方法。即根据细胞核、染色体组 或每一个染色体的DNA含量以及其他化学特性去鉴别染色 或每一个染色体的DNA含量以及其他化学特性去鉴别染色 体。如DNA含量的差别,一般能反映染色体大小的差异, 体。如DNA含量的差别,一般能反映染色体大小的差异, 因此可作为组型分析的内容。染色体组型分析有助于探明 染色体组的演化和生物种属间的亲缘关系,对于遗传研究 与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要。

三、实验材料 :
小麦、人等有丝分裂中期标本和显微摄影所得放 大照片。 要求染色体分散良好,无重叠或重叠很少,着丝 要求染色体分散良好,无重叠或重叠很少,着丝 粒、随体等形态清晰可辨。

四、实验用具药品
1.仪器用具:显微镜(附摄影装置)、冰箱、恒温水浴 锅、135胶卷、载玻片、盖玻片、剪刀、浆糊、镊子、 白纸、解剖针、刀片及毫米尺。 2.药品试剂:无水酒精、70%酒精、冰乙酸、碱性品红、 苯酚、甲醛、山梨醇、对二氯苯、1N盐酸、0.05%秋 水仙碱。

五、实验步骤:

(以大麦2n=14为例) 1.种子萌发和取材:大麦种子置于培养皿内湿滤纸上, 25℃恒温箱中,根长2—3cm切取。 2.预处理:a、幼根放在蒸馏水中,置0—4℃冰箱中处 理20小时;b、幼根用0.05%秋水仙溶液处理7小时; 3.固定:新配的材料用卡诺氏固定液固定24小时后,放 入70%乙醇中置于冰箱中备用。 4.解离:蒸馏水清洗后,放于1N盐酸中,60℃恒温水浴 10分钟。 5.染色和压片: 6.镜检:

五、实验步骤:

染色体照片的测量和对比:
1.测量:在已放大的照片上对染色体进行测量和描述,记录染色体形态测量数据, 如下: 臂率=长臂/短臂 着丝粒指数=短臂/该染色体长度 总染色体长度=该细胞单倍体全部染色体长度(包括性染色体)之和 相对长度=每一个染色体的长度/总长度 2.配对:根据测量数据,即染色体相对长度、臂率、着丝粒指数、次溢痕的有无及 位置、随体的性状和大小等进行同源染色体配对。 3.染色体排列:染色体对从大到小,短臂向上、长臂向下,各染色体的着丝粒排在 同一条直线上。有特殊标记的染色体(如含有随体的)及性染色体的单独排列。

五、实验步骤:

染色体照片的测量和对比: 4. 剪贴:将上述染色体按顺序粘贴在实验报告上,粘贴 时,应使着丝点处于同一水*线上,一律短臂在上, 长臂在下,构成核型图。 要求:染色体从大到小,短臂向上,长臂向下,各染色 体着丝粒排在同一直线上。有特殊标记的染色体(如 含有随体的)及性染色体可单独排列。

编号

绝对 长度 (μm)

相对 长度

短臂 (μm)

长臂 臂 着丝粒 随体 染色体 (μm) 率 指数 有无 类型

1 2 3 4 5 6 ……

染色体类型由臂比值确定。 Total length: μm P217

臂比(长臂/ 臂比(长臂/短臂) 1-1.7 1.711.71-3.0 3.013.01-7.0 >7.01

形态特征 m 中着丝粒染色体 sm *中着丝粒染色体 st *端着丝粒染色体 t 端着丝粒染色体

染色体类型由臂比值确定。 Total length: μm P217

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核型分析之教师用图片 核型分析之教师用图片
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核型分析之学生用图片 核型分析之学生用图片
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